RNA提取試劑在選擇時(shí)應(yīng)考慮的幾個(gè)點(diǎn)？
更新時(shí)間：2020-04-22 點(diǎn)擊次數(shù)：1886次
RNA提取試劑在選擇時(shí)應(yīng)考慮的幾個(gè)點(diǎn)？
RNA提取試劑主要用于各種植物、動(dòng)物、微生物的RNA提取，在每個(gè)試劑盒里都有一份說(shuō)明使用說(shuō)明書。實(shí)驗(yàn)者只需要按照說(shuō)明書上的步驟操作即可。使用時(shí)無(wú)需配制其它試劑，非常方便，適合于RNA的快速提取。
所提取的RNA完整性好、純度高，可用于分子生物學(xué)后實(shí)驗(yàn)。但較好的試劑盒價(jià)格比較貴，在實(shí)驗(yàn)室可以根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要來(lái)定奪試劑盒的使用。
本產(chǎn)品提供了一種快速，簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)有效的方法，可從全血，哺乳動(dòng)物細(xì)胞，細(xì)菌細(xì)胞和真菌細(xì)胞中分離總RNA。優(yōu)化的洗滌劑和離液鹽用于裂解細(xì)胞并滅活核糖核酸酶。專門的高鹽緩沖系統(tǒng)允許RNA物質(zhì)基團(tuán)結(jié)合到旋轉(zhuǎn)柱的玻璃纖維基質(zhì)上，同時(shí)使污染物通過(guò)柱被有效地洗去。純的RNA用RE緩沖液洗脫，不用酚提取或醇沉淀。
那我們?cè)谶x擇RNA提取試劑的時(shí)候應(yīng)考慮哪些因素呢？一起來(lái)看看下面的內(nèi)容吧！
一：操作簡(jiǎn)便性
操作簡(jiǎn)便性也是拭子提取試劑選擇的一個(gè)重要因素。操作過(guò)于復(fù)雜，不僅費(fèi)時(shí)費(fèi)力，還容易導(dǎo)致樣本間的交叉污染，也容易損失樣本。特別是用于臨床檢測(cè)或樣本量較多情況下的檢測(cè)，操作復(fù)雜如果導(dǎo)致交叉污染會(huì)引起誤診，還會(huì)影響出檢測(cè)報(bào)告的時(shí)間。因而，選用操作簡(jiǎn)便、流暢的提取試劑盒非常重要。
二：提取的核酸純度要高
一般RNA 溶液OD260/OD280比值應(yīng)在1.8--2.0之間，如果提取的RNA溶液OD260/OD280比值小于1.8，通常說(shuō)明有蛋白質(zhì)或酚、多糖等的污染。如果提取的RNA溶液OD260/OD280>2.0，則表明RNA有降解。不同品牌的試劑盒提取的RNA純度略有差別。
三：考慮提取試劑中應(yīng)含有較高的提取得率
對(duì)離心柱法而言，拭子核酸得率的高低，主要取決于離心柱對(duì)核酸的吸附能力、洗脫能力以及裂解液的裂解消化能力。離心柱的硅膠膜RNA吸附性能好、裂解液細(xì)胞裂解能力強(qiáng)、洗脫液洗脫能力好，核酸的提取得率就高。反之，如果離心柱硅膠膜吸附能力不好，裂解液和洗脫液沒(méi)有經(jīng)過(guò)很好的優(yōu)化，RNA提取試劑的提取得率就不高。至于RNA提取得率的確定，我們可以使用紫外分光光度法，但是不能作為判斷得率的標(biāo)準(zhǔn)，還是要做個(gè)PCR或熒光定量。
